|
|
|
|
〈以甲醇在清洗管柱時〉-【管柱分析應用-討論區-www.coi.tw 】
| 文章主題 : 以甲醇在清洗管柱時 |
人氣指數 : 7090 |
發表時間 :2010/1/19 下午 03:31:30
|
對不起請問一下
我在做HPLC時
以甲醇在清洗管柱時, UV檢測器的數值會上下據烈的跳動由0.9X到-0.9X!!!
為何會這樣呢?
在先前進行試驗時不會如此,但最近會發生如此怪異現象!?
是樣品的問題?
是沖提溶劑的問題?
是管柱的問題?
還是UV檢測器的問題?
能否麻煩幫我解答, 感激不盡!!
謝謝
|
| 發表時間 :
2010/1/19 下午 03:32:32
|
回應者
:
吳健三
|
性別 :
男
|
|
|
|
|
您起始移動相為水:甲醇=10/90，60分鐘後改變為水:甲醇=90/10，不論Isocratic或Gradient作法，移動相由高溶洗的甲醇比例，降為低甲醇比例，似乎不符合逆相層析法，C18,C8...操作法則。
請您再確定一次移動相內容比例增變條件，再討論。
|
| 發表時間 :
2010/1/19 下午 03:33:24
|
回應者
:
afu
|
性別 :
男
|
|
|
|
|
如果我的水:甲醇=10:90, 60分鐘後為水:甲醇=90:10, 流速為0.8ml/min, 而你所說的120ml是應洗多久才可以呢,因為我的管柱已洗了好久了,可是一直洗不乾淨, 問題一直存在著,那該怎麼做?繼續洗, 還是換支管柱, 還是有其他方法??
謝謝
|
| 發表時間 :
2010/1/19 下午 03:34:31
|
回應者
:
吳健三
|
性別 :
男
|
|
|
|
|
您可能採用C18或C8...逆相層析管柱，您沒有提到最後分析的移動相的內容與比例，因此我們猜想:
1.假使你最後分析移動相只是甲醇(乙晴)與水調和，(沒有酸、鹽調和)結束分析，用甲醇流洗層析管柱，在檢測出現混亂"吸收值Absorbance"，說明您注入分析，當時的移動相未能將分析物全部溶洗帶出，當時殘存被保持於管柱內。當高溶洗的甲醇，流洗時，則將之該等殘存持續溶洗出，在檢測器一時出現混亂吸收值。按一般甲醇流洗約120ml，大致上可將管柱流洗乾淨，而有穩定的吸收值。
2.假使您最後移動相是水相調和酸，或鹽類、分析畢，直接甲醇流洗，非常不好，此時吸光值仍然是混亂值，建議您先用MeOH/H2O=20/80先流洗約120ml，再將甲醇流洗約120ml即可。基本上，您所擔心的，那些都不是問題。
|
| 發表時間 :
2010/1/19 下午 03:35:27
|
回應者
:
吳健三
|
性別 :
男
|
|
|
|
|
若您在甲醇/水=90/10之高有機移動相之下，某些分析物仍會殘存層析管柱，建議您分析畢用，甲醇/THF=50/50，流洗約100ml，再以甲醇流洗，約50ml即可。
|
管柱分析應用-討論區-【www.coi.tw 購物網】
| |
↓看看其他人正在討論甚麼話題↓ |
作者 |
人氣指數 |
最後回應時間 |
|
1
|
|
Tw17
|
432
|
2009/2/20 下午 09:46:59
|
|
2
|
|
搶刊價
|
1121
|
2015/12/21 上午 08:05:08
|
|
3
|
|
基因科學
|
1263
|
2013/11/25 下午 03:10:11
|
|
4
|
|
發明王
|
1703
|
2013/7/21 下午 02:08:40
|
|
5
|
|
Pixar
|
901
|
2013/7/4 下午 07:52:44
|
|
6
|
|
展覽訊息
|
1730
|
2017/2/3 上午 08:31:30
|
|
7
|
|
企業焦點
|
2686
|
2017/2/3 下午 04:54:36
|
|
8
|
|
Amersham
|
2275
|
2013/6/8 下午 05:21:27
|
|
9
|
|
Steve王
|
1190
|
2014/4/2 上午 08:39:12
|
|
10
|
|
Cute
|
925
|
2013/9/21 上午 08:01:16
|
|
11
|
|
化學醬油
|
8419
|
2016/6/25 下午 02:34:26
|
|
12
|
|
Chemical Dictionary
|
768
|
2014/11/9 下午 04:58:22
|
|
13
|
|
科學實驗
|
1020
|
2014/12/14 下午 01:11:32
|
|
14
|
|
疾病醫霸
|
741
|
2014/3/5 上午 10:17:53
|
|
15
|
|
Cute
|
1108
|
2014/3/13 下午 08:52:30
|
|
16
|
|
台大動物研究中心
|
3449
|
2010/2/1 上午 11:45:26
|
|
17
|
|
樂活養生
|
2218
|
2009/4/2 上午 10:07:14
|
|
18
|
|
RAININ
|
3615
|
2009/2/20 下午 10:45:48
|
|
19
|
|
科學實驗
|
808
|
2014/11/23 下午 01:22:52
|
|
20
|
|
展覽訊息
|
3781
|
2014/3/17 上午 06:54:06
|
|
21
|
|
Cute
|
1290
|
2013/12/19 上午 08:00:33
|
|
22
|
|
Chemical Dictionary
|
2886
|
2017/2/9 上午 06:17:58
|
|
23
|
|
時事報導
|
1362
|
2014/3/4 下午 01:08:42
|
|
24
|
|
儀器百科
|
597
|
2015/4/29 下午 09:20:20
|
|
25
|
|
Cute
|
654
|
2013/9/3 下午 03:02:04
|
|
26
|
|
科學實驗
|
933
|
2014/11/19 下午 11:40:54
|
|
27
|
|
時事報導
|
1447
|
2013/12/26 上午 10:39:48
|
|
28
|
|
鍾先生
|
1650
|
2017/2/9 上午 06:16:19
|
|
29
|
|
產業動態
|
1036
|
2014/11/18 下午 09:54:30
|
|
30
|
|
發明創意
|
649
|
2014/9/17 上午 09:56:50
|
|
31
|
|
發明王
|
1043
|
2013/7/9 上午 11:10:54
|
|
32
|
|
江阿烈
|
5260
|
2012/3/16 下午 03:20:06
|
|
33
|
|
慈濟大學
|
2412
|
2010/2/1 下午 05:42:23
|
|
34
|
|
Cute
|
1024
|
2013/10/8 上午 06:48:55
|
|
35
|
|
Vincent Chang
|
891
|
2017/2/3 下午 05:55:07
|
|
36
|
|
基因科學
|
715
|
2014/11/28 上午 09:20:04
|
|
37
|
|
疾病醫霸
|
1211
|
2014/11/20 下午 05:07:03
|
|
38
|
|
樂活
|
1670
|
2009/4/1 上午 09:11:43
|
|
39
|
|
Chemical Dictionary
|
441
|
2014/11/9 下午 04:58:21
|
|
40
|
|
儀器百科
|
743
|
2015/7/22 下午 06:27:42
|
|
41
|
|
發明王
|
1848
|
2013/7/18 下午 07:30:05
|
|
42
|
|
發明王
|
763
|
2013/7/9 下午 04:17:39
|
|
43
|
|
基因科學
|
703
|
2014/11/10 下午 12:54:24
|
|
44
|
|
發明王
|
1951
|
2013/7/20 下午 09:51:14
|
|
45
|
|
經濟日報
|
2597
|
2010/1/27 上午 08:41:41
|
|
46
|
|
發明創意
|
564
|
2014/11/23 下午 01:42:59
|
|
47
|
|
Cute
|
995
|
2013/12/18 下午 02:01:44
|
|
48
|
|
科學實驗
|
636
|
2014/11/20 下午 01:22:31
|
|
49
|
|
發明王
|
1042
|
2013/7/14 下午 06:44:22
|
|
50
|
|
Chemical Dictionary
|
574
|
2014/11/9 下午 04:58:21
|
|
|
|
|
|
|
